Avaliação do perfil de tolerância linhagens de Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii frente ao fluconazol

Abstract

As infecções por Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii causam
aproximadamente um milhão de casos de meningite criptococcócica por ano entre
as pessoas com AIDS/HIV no mundo. Vários trabalhos demonstram que o insucesso
da terapia medicamentosa não está diretamente relacionado à resistência aos
antifúngicos observada pelos testes de suscetibilidade antimicrobianas in vitro
tradicionais. Tolerância pode ser definida como a habilidade, intrínseca ou não, de
microrganismos sobreviverem na presença transitória de altas concentrações de
antibióticos. Devido a isso, o objetivo do trabalho foi avaliar o perfil de tolerância de
C. neoformans e C. gattii frente ao fluconazol. Para isso, a estratégia experimental
foi: a) determinar a concentração mínima inibitória (CIM) de C. neoformans e C.
gattii frente ao fluconazol através de testes de micro diluição em caldo - b)
classificar as linhagens como tolerante através do ensaio de curva de morte - c)
verificar se a tolerância interfere na velocidade de crescimento das linhagens - d)
analisar se as linhagens tolerantes compartilham alterações em morfometria por
microscopia óptica, quantidade de ergosterol por espectrofotometria e potencial
zeta por espalhamento de luz. Os resultados preliminares demonstraram que as
CIMs para 50% de inibição e 100% de inibição para as linhagens de C. gattii variaram
de 8 ug/mL até 64 ug/mL e de 16 ug/mL até 128 ug/mL, respectivamente. Já para
as linhagens de C. neoformans variaram de 4 ug/mL até 64 ug/mL e de 8 ug/mL até
128 ug/mL, respectivamente. Observou-se que a C. gattii ATCC 161 e C. neoformans
ATCC H99 foram que apresentaram menor tempo de morte de 50% da população
(TM50): 48 horas e 60 horas, respectivamente. Já as linhagens C. gattii ATCC R265
e C. neoformans ATCC 626 apresentaram TM50 acima de 72 horas para ambas.
Observou-se também que as linhagens mais tolerantes eram aquelas que tinham
crescimento mais lento. Os outros experimentos propostos ainda estão em fase de
execução.